期刊简介

  中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。

           

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  • 杂志名称:中华医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0376-2491
  • 国内刊号:11-2137/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华医学杂志2002年第11期

胰岛素基因在非β细胞中的调节表达

沈坤堂;秦新裕;张新;程志红;许相儒;韩泽广

关键词:人胰岛素原基因, 基因表达调控, 糖尿病, 胰岛素依赖型, 基因治疗
摘要:目的应用四环素(Tet)可调控性表达系统,建立条件控制性人工β细胞株,定量调节胰岛素基因在tet293细胞中的表达.方法构建含四环素反应元件和表达胰岛素原基因的重组载体pTRE2mINS.再将此载体与具有潮霉素抗性的质粒pTK-Hyg共转染能稳定表达反义四环素激活因子的细胞株tet293,然后用潮霉素筛选表达胰岛素的细胞株,通过四环素的衍生物强力霉素(Dox)调节胰岛素在此细胞株中的表达.采用Northern印迹、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和放射免疫分析法,从mRNA和蛋白水平观察细胞培养基中强力霉素浓度的变化对胰岛素基因表达的影响.结果从28个单克隆细胞株中筛选1株能自主分泌一定量的胰岛素,又能受强力霉素调控分泌的细胞株.当细胞培养液中加入或不加强力霉素时,培养基中胰岛素的表达量分别为每24 h 241.0 U/1.0×106细胞和每24 h 9.7 U/1.0×106细胞,加强力霉素组是不加强力霉素组的25倍.而且随着强力霉素浓度的增加,tet293细胞内外胰岛素的表达水平逐步增高.结论人胰岛素基因在tet293细胞中的成功转移和高效表达,受四环素及其衍生物定时、定量调节,从而提高糖尿病基因治疗的精确性,安全性和有效性.