期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
β2糖蛋白I基因转染HEp-2细胞株中融合蛋白的表达及临床应用
吕良敬；陈顺乐；顾越英；沈南；鲍春德；王元；杨程德；叶萍；俞
关键词：β2糖蛋白I, 基因转染, Hep-2细胞, 免疫荧光技术, 自身抗体
摘要：目的观察β2糖蛋白I(β2GP I)基因转染的HEp-2细胞(HEp-β2GP I)中β2GP I融合蛋白的过度表达.探讨以HEp-β2GP I为底物间接免疫荧光(IIF)法检测抗β2GP I抗体的可行性.方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增人源β2GP I cDNA,克隆入pEGFP-C1,并转染HEp-2细胞.通过RT-PCR、共焦荧光显微镜、免疫印迹法(IBT) 及IIF鉴定β2GP I-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的表达和抗原性.以转染细胞为底物IIF检测19份疑诊继发性抗磷脂综合征(APS)病人、1份原发性APS病人及10份正常人血清的IgG-β2GP I,与同时进行的ELISA法检测IgG-ACL、IgG-β2GP I的结果作比较.结果 (1)获得的HEp-β2GP I细胞传十几代后仍具有较强的β2GP I-GFP表达,融合蛋白保持β2GP I的抗原性,其IIF表型具有特征性.(2)IIF法测血清IgG-β2GP I 的结果显示:7份病人血清出现特征性免疫荧光表型,而正常人血清均无荧光染色.3种方法的比较性研究显示IIF法测IgG-β2GP I与ELISA法测IgG-β2GP I的一致性程度佳(Kappa值0.886).(3)HEp-β2GP I保持了原型HEp-2细胞检测抗核抗体(ANA)的荧光特性,且检出2例原型HEp-2细胞IIF ANA是阴性的血清.结论 HEp-β2GP I转染细胞株可用于IIF检测抗β2GP I,而且仍可作为常规IIF ANA检测的底物.
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