期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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首页>中华医学杂志
- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
肝细胞生长因子在人肝细胞中的表达及对肝细胞损伤的保护作用
何勇；周峻；窦科峰
关键词：肝细胞生长因子, 载体蛋白质类, 肝细胞, 基因转移
摘要：目的构建肝细胞生长因子(HGF)真核细胞表达载体,并观察其在人正常肝细胞中的表达以及对细胞增殖和抗损伤能力的影响.方法利用基因重组技术将HGF与绿色荧光蛋白(GFP)融合并构建真核表达质粒,通过脂质体介导法,导入正常人肝细胞系中.用荧光显微镜以及免疫组织化学方法观察HGF表达情况.采用[3H]-TdR掺入DNA法、PCNA免疫组织化学观察肝细胞DNA合成,了解肝细胞增殖能力的变化.用CCl4造成急性肝细胞损伤,通过测定细胞存活率、细胞内丙氨酸氨基转移酶(ALT)、K+的漏出量了解肝细胞的抗损伤能力.结果酶切鉴定证实HGF片断已克隆到pEGFP-N3的BamHⅠ和SalⅠ位点之间,在转染人正常肝细胞后,利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达,用免疫组化方法进一步证实了HGF蛋白在细胞中的表达.[3H]-T转导HGF的肝细胞的DNA合成明显增加(转染96h后,[3H]-TdR掺入量为对照组的7倍).PCNA免疫组化结果显示转导HGF的肝细胞阳性率明显增加,肝细胞增殖活性增加.转导HGF的肝细胞抗CCl4损伤的能力明显增强,肝细胞存活率显著提高(83%与61%,P<0.05),细胞内丙氨酸氨基转移酶(ALT)、K+的漏出显著降低(分别为35.16 U*L-1与 65.31 U*L-1,P<0.01,5.59 mmol/L 与6.02 mmol/L,P<0.01).另外从转导的肝细胞提取的培养液可对其他非转染细胞起促增殖作用,而这种作用可被HGF抗体封闭,提示HGF可被转导的肝细胞分泌到培养液中,并且分泌的HGF具有活性. 结论转染的HGF可在肝细胞中表达并有促细胞分裂活性,而且转染HGF后的肝细胞抗肝损伤能力增强.
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