期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
肺动脉内皮细胞缺氧时内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化及蛋白激酶C亚型的作用
陆德琴；李会革；叶仕桥；叶红；金肆；王迪浔
关键词：缺氧, 一氧化氮合酶, 基因表达, 内皮细胞, 肺动脉
摘要：目的研究蛋白激酶C(PKC)及其亚型对缺氧引起的肺动脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达变化的调控作用.方法将原代培养的猪肺动脉内皮细胞置于缺氧(5%O2)条件培养2、6、12、24、48 h,用RT-PCR的方法检测eNOS mRNA的含量.用蛋白质免疫印迹技术检测eNOS和8种PKC亚型的表达水平.加入选择性PKC抑制剂BIMⅠ(1 μmol/L)和G6983(1 μmol/L)后观察其对5%O2所引起的eNOS mRNA水平变化的影响.采用瞬时转染的方法,通过荧光素酶报告基因实验检测eNOS基因转录起始点上游长1.6 kb启动子区域的活性.加入转录抑制剂放线菌素D后比较不同时间点常氧培养组和5%O2培养组eNOS mRNA的含量.结果 5%O2培养12 h可使肺动脉内皮细胞eNOS表达增加,24 h达高峰.缺氧24 h组eNOS mRNA和蛋白质水平分别是常氧组的171%±18%(P<0.01)和166%±21% (P<0.05).BIMⅠ和G6983可抑制缺氧24 h引起的eNOS mRNA表达上调.缺氧时新型蛋白激酶Cε(nPKCε)发生了膜转位.报告基因实验表明,缺氧24 h肺动脉内皮细胞eNOS基因启动子活性明显增加,为常氧组的(2.29±0.73)倍.放线菌素D实验表明缺氧对肺动脉内皮细胞eNOS mRNA的稳定性无明显影响.结果表明,缺氧上调eNOS mRNA是由于基因转录增强而不是mRNA稳定性增加所致.结论缺氧通过增强肺动脉内皮细胞eNOS基因的转录上调eNOS基因的表达,此过程与nPKCε的激活有关.
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