期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称:中华医学杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:0376-2491
- 国内刊号:11-2137/R
- 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞转分化的调节机制
张春;朱忠华;刘建社;杨晓;邓安国
关键词:生长物质, 肾小管, 上皮细胞, 肌动蛋白类, 胶原
摘要:目的观察结缔组织生长因子(CTGF)对体外培养的人肾小管上皮细胞转分化的直接影响,并探讨阻断内源性CTGF表达对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞转分化的干预效果,以阐明CTGF在肾小管上皮细胞转分化中的作用.方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HKC).在观察CTGF对HKC的直接作用时,将HKC细胞分为三组:(1)对照组;(2)小剂量CTGF组:培养液中加入重组人CTGF(rhCTGF),终浓度为2.5 μg/L;(3)大剂量CTGF组: rhCTGF终浓度为5.0 μg/L.在探讨CTGF在TGF-β1诱导HKC转分化中的作用时,将细胞分为4组:(1)正常对照组;(2)TGF-β1刺激组(培养液加入重组人TGF-β1蛋白,浓度为10.0 μg/L);(3)TGF-β1+CTGF正义寡核苷酸(ODN)组(先以CTGF正义ODN转染HKC,再加TGF-β1刺激);(4)TGF-β1+CTGF反义ODN组(先以CTGF反义ODN转染HKC,再加TGF-β1刺激).用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定HKC α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅳ型胶原(col Ⅳ) mRNA水平的变化;间接免疫荧光方法检测HKC 胞浆内α-SMA的表达;流式细胞仪检测α-SMA阳性细胞百分率; ELISA方法测定培养液上清中col Ⅳ的浓度.结果不同浓度rhCTGF作用于HKC 24 h后,α-SMA mRNA水平显著升高(P<0.01),而col Ⅳ mRNA表达水平明显下降(均P<0.01);刺激48 h后,胞浆α-SMA表达明显增强,流式细胞仪测得三组细胞α-SMA阳性百分率依次为:2.4%、38.9%、65.5% (P<0.01);ELISA结果表明,rhCTGF抑制了col Ⅳ的分泌(P<0.01).TGF-β1可诱导HKC高表达CTGF和α-SMA.转染后6 h,CTGF 反义ODN可显著抑制HKC表达CTGF和α-SMA mRNA(P<0.01).转染后48 h,CTGF反义ODN可明显抑制胞内α-SMA蛋白合成.结论 CTGF在体外能刺激肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞(MyoF)转分化,而CTGF反义ODN的导入可有效抑制TGF-β1诱导的转分化过程.因此, CTGF可能是调节肾小管上皮细胞转分化的重要因子.
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