期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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首页>中华医学杂志
- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
葡萄糖糖基神经酰胺合成酶特异性小干扰RNA表达载体的构建及其逆转乳腺癌细胞耐药的研究
孙妍琳；周庚寅；李锴男；李文通；宋现让；高鹏
关键词：葡糖转移酶类, RNA, 乳腺肿瘤, 抗药性, 多药
摘要：目的构建葡萄糖糖基神经酰胺合成酶 (GCS) 小干扰RNA表达载体,观察其对乳腺癌耐药细胞(MCF-7/ADR)GCS基因表达和耐药性的影响.方法设计合成2对GCS基因的特异性siRNA,分别定向克隆入真核表达载体pSUPER,构建pSUPER-GCS1和pSUPER-GCS2重组质粒,脂质体Lipofect AMINE 2000介导转染MCF-7/ADR细胞,空载体pSUPER转染作为对照,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析GCS mRNA的表达,流式细胞仪观察GCS蛋白的表达,四氮唑盐法检测阿霉素对MCF-7/ADR细胞的半数抑制浓度(IC50),流式细胞技术检测细胞凋亡率的改变.结果酶切分析和测序证实成功构建了针对GCS的siRNA表达载体pSUPER-GCS1和pSUPER-GCS2.两对重组质粒均可特异性抑制GCS基因表达,转染后48 h GCS mRNA抑制率分别为89.4%、88.5%,GCS蛋白含量分别下降为8.3%±1.0%,9.2%±0.8%,四氮唑盐法显示重组质粒对阿霉素耐药性相对逆转率分别为93.7%、91.6%,明显提高了乳腺癌细胞对于阿霉素的药物敏感性,流式细胞仪结果表明细胞凋亡率增加为15.38±1.16,13.92±1.73,而空载体对照组无以上作用.结论 GCS特异性siRNA表达载体构建成功,且有效抑制了GCS基因表达,并通过诱导耐药细胞凋亡率增加,逆转乳腺癌细胞多药耐药.
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