期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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首页>中华医学杂志
- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α治疗骨肉瘤的实验研究
吴强；杨述华；叶树楠；王锐英
关键词：细胞低氧, RNA, 核, 骨肉瘤, 基因疗法
摘要：目的观察靶向缺氧诱导因子(HIF)-1α的短发夹状小干扰RNA基因转染对骨肉瘤生长的影响.方法针对HIF-1α构建短发夹状siRNA真核表达载体(pSilencer)-HIF并转染骨肉瘤细胞系(SaOS)-2 .骨肉瘤细胞置于缺氧诱导培养基中培养.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹沉淀观察HIF-1α的基因沉默效果.四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析检测细胞体外增殖活力,透射电镜,原位末端标记TUNEL法,Annexin V/PI双标记法检测细胞的凋亡.同时,通过裸鼠移植瘤模型观察HIF-1α基因沉默后对骨肉瘤体内治疗效果.结果测序证实成功构建HIF-1α的短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer-HIF,转染骨肉瘤细胞后,HIF-1α基因表达显著抑制(90%).与对照组比较,pSilencer-HIF转染组骨肉瘤细胞缺氧状态下的增殖活性显著降低.缺氧培养72 h后,透射电镜、TUNEL法显示细胞典型凋亡特征,Annexin V/PI双标检测转染组细胞凋亡率为18.71%±0.98%,明显高于pSilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01).裸鼠移植瘤实验显示pSilencer-HIF转染组肿瘤生长减慢,成瘤率下降,肿瘤组织中可见大量坏死组织.结论靶向HIF-1α基因的短发夹状siRNA可以有效阻断骨肉瘤缺氧耐受转导通路,抑制骨肉瘤细胞的生长.
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