期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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首页>中华医学杂志
- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
分泌人干扰素α-2a的重组卡介苗的构建、表达与鉴定
刘海涛；孙晓文；张沂南；卓见；凡杰；王丰；夏术阶
关键词：卡介苗, 膀胱肿瘤, 干扰素α-2a, RNA, 信号肽
摘要：目的 构建分泌人干扰素α-2a(IFNα-2a)的重组卡介苗(Rbcg).方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术从卡介苗基因组中扩增出Ag85B的信号肽基因序列,从pBIFNα-2a质粒中扩增出 IFNα-2acDNA全长序列.利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒Pmv261结核杆菌HSP60启动子下游,构建一个分泌型的卡介苗穿梭表达质粒pMSIFNα-2a.利用电穿孔技术将质粒pMSIFNα-2a转入卡介苗得到Rbcg,分别用PCR扩增和Western印迹检测Rbcg菌体和培养上清中IFNα-2a的DNA和蛋白表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Rbcg培养上清中IFNα-2a的含量.结果酶切鉴定、PCR扩增和DNA测序分析结果均表明,所克隆的信号肽DNA片段和IFNα-2a片段与文献结果完全一致,pMSIFNα-2a的连接方向正确,阅读框与预期完全一致.以Rbcg质粒DNA为模板,通过PCR扩增得到IFNα-2a的基因片段,Western印迹证实Rbcg分泌的蛋白能与人IFNα-2a的抗体特异性结合,ELISA法检测到Rbcg培养上清中高含量的IFNα-2a(324.57 pg/ml).结论构建的Rbcg能够分泌具有功能活性的细胞因子IFNα-2a,有望成为膀胱肿瘤免疫治疗的一种有效方法.
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