期刊简介

  中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。

           

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  • 杂志名称:中华医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0376-2491
  • 国内刊号:11-2137/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华医学杂志2007年第36期

Pim-3质粒构建体在大鼠活体肝组织的表达和活性的研究

刘亮明;邓欢;张吉翔;罗杰;尹东;郭宏兴

关键词:脱噬作用, 质粒, Pim-3基因, 载体构建
摘要:目的 构建大鼠Pim-3绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒并观察其在活体肝组织的表达和活性.方法 采用逆转录-PCR的方法获取目的 cDNA,重组质粒经酶切鉴定和测序;大鼠活体基因肝靶向性转染通过尾静脉流体力学注射法完成,肝细胞凋亡的诱导采用腹腔内注射内毒素和D-半乳糖胺(D-GalN)来实现.动物分为A、B、C和D组(即正常、对照、空质粒和重组质粒组,每组8只);肝组织GFP表达通过荧光显微镜、Pim-3表达通过逆转录(RT)-PCR方法检测;肝细胞凋亡采用缺口末端标记技术(TUNEL)分析和半胱天冬酶-3活性检测.结果 成功构建GFP表达质粒pEGFP-N2/Pim-3;重组质粒和空质粒DNA通过流体力学注射法被成功转染入大鼠活体肝组织内;4组Pim-3的相对表达水平分别为0.06±0.02、0、0、0.49±0.15.D组与其他3组差异均有统计学意义(均P<0.01);4组肝细胞的凋亡指数(AI)分别为:(3.1±0.7)%,(72.5±6.1)%、(69.8±5.7)%和(4.9±1.2)%;肝组织半胱天冬酶-3活性分别为(60±15)、(147±55)、(142±50)和(76±27)pmol·min-1·mg-1,D组与B、C两组间差异有统计学意义(均P<0.01).结论 构建的重组体质粒pEGFP-N2/Pim-3能在大鼠活体肝组织内有效表达,并发挥其对肝细胞凋亡的抑制效应.