期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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首页>中华医学杂志
- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
siRNA沉默细胞周期蛋白A2基因对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用
刘叶；范顺武；丁佳逸；赵兴；沈炜亮
关键词：骨肉瘤, RNA, 细胞周期蛋白A
摘要：目的 研究siRNA对骨肉瘤MG-63细胞株及正常成纤维细胞细胞周期蛋白cyclin A2基因表达的抑制及对细胞增殖的影响.方法 设计并化学合成靶向cyclinA2基因的siRNA,用oligofectamine将其转染到骨肉瘤细胞系MG-63及正常人成纤维细胞(HSF)中,用无义siRNA转染作为阴性对照,以单加缓冲液磷酸盐缓冲液(PBS)作为空白对照,实时-聚合酶链反应(PCR)、Western印迹方法检测cyclinA2基因沉默效果,采用MTT、RT-PCR、流式细胞、平板克隆培养等方法评价cyclinA2基因表达后被抑制后细胞的生长状态,同时检测细胞PCNA及cyclinB1基因表达的改变.结果 1、10、50、100 nmol/L浓度的cyclinA2-siRNA分别使MG-63细胞cyclinA2基因表达降低了9.4%,56.4%,79.2%和84.3%,同时cyclinA2蛋白表达也相应降低.转染10 nmol/L及50 nmol/L siRNA后48 h,MG-63细胞增殖抑制分别达到39.1%及54.9%,细胞周期阻滞于G0/G1期,平板克隆形成率降低,细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)及cyclinB1的mRNA表达水平明显下降.对正常成纤维细胞HSF,50 nmol/L cyclinA2-siRNA可抑制58.1%的cyclinA2基因及蛋白表达,其导致细胞周期出现轻度改变,但细胞的增殖及平板克隆形成能力未受影响.结论 cyclinA2是肿瘤细胞增殖所依赖的关键基因,针对cyclinA2基因的siRNA能有效降低细胞中cyclinA2 mRNA及蛋白的表达,其能抑制骨肉瘤细胞的生长而对正常细胞的增殖影响很小,靶向cyclinA2的siRNA有望成为治疗骨肉瘤的新途径.
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