期刊简介

  中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。

           

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  • 杂志名称:中华医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0376-2491
  • 国内刊号:11-2137/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华医学杂志2008年第04期

双重实时荧光逆转录聚合酶链反应检测尿液DD3/PSA mRNA比值及其应用

陈凤萍;陈俐丽;沈默;陈伟;陶志华;吴秀玲;胡元平;李澄棣;陈占国;陈晓东

关键词:前列腺肿瘤, 基因, 聚合酶链反应, 尿液
摘要:目的 建立双重实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测尿液DD3/PSA mRNA比值,评价其初步应用.方法 分别在前列腺特异性抗原(PSA)基因外显子1和2、差异显示编码3(DD3)基因外显子1和3之间设计一对引物和一条探针,PSA和DD3基因的TaqMan-MGB探针5'分别标记HEX和FAM荧光素,建立双重实时荧光RT-PCR检测尿液DD3/PSA mRNA比值的方法,并对方法学进行评价.对34例前列腺癌(Pca)、44例良性前列腺增生(BPH)患者前列腺按摩后尿液中的DD3/PSA mRNA比值进行检测,评价其临床应用价值.结果 扩增产物经测序证明为PSA和DD3特异性片段.以LNCaP细胞cDNA作模板,PSA mRNA和DD3 mRNA低检测限分别为0.6细胞/反应和60细胞/反应.DD3/PSA mRNA比值批内、批间变异系数分别为3.8%~4.7%和4.1%~4.9%.Pca组尿液DD3/PSA mRNA比值明显高于BPH组(P<0.01).尿液DD3/PSA mRNA比值诊断Pca的ROC曲线下面积(AUC)为0.746(95%CI:0.630~0.862),当截断值为0.254时其敏感度和特异度分别为64.7%和77.3%,其阳性率与临床和病理分级均无关.结论 成功建立了双重实时荧光RT-PCR检测尿液DD3/PSA mRNA比值的分子生物学诊断方法.该方法对Pca诊断具有较高特异度和敏感度,且节省操作时间、降低实验成本,有望成为Pca早期诊断的有效方法.