期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
对比研究两种腺病毒载体对大鼠骨髓间充质干细胞的转染效率及机制
胡硕；熊玲静；余剑英；兰晓莉；张永学
关键词：干细胞, 转染, 腺病毒, 大鼠
摘要：目的 对比研究两种腺病毒载体Ad5/EGFP和AdF35/EGFP转染SD大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)的效率及其机制.方法 用密度梯度法从大鼠骨髓中分离出rBMSC,流式细胞仪检测其表面相关标志抗原(CD90、Cd29、CD44、CD34、CD11b和CD45)以鉴定rBMSC.用不同梯度感染复数(MOI)的Ad5/EGFP和AdF35/EGFP分别转染rBMSC,MTT检测二者对rBMSC生长的影响.转染后第1～9天,荧光显微镜下观察转染情况,同时流式细胞仪检测转染效率及平均荧光强度,实时PCR检测rBMSC表面CAR及CD46的表达水平.结果 rBMSC表达CD90、Cd29、CD44阳性,而CD34、CD11b、CD45表达为阴性.MOI≤1600时,Ad5/EGFP对rBMSC的生长无明显抑制作用(t=3.12,P=0.052);MOI≤1000时,AdF35/EGFP对rBMSC的生长无明显抑制作用(t=2.20,P=0.15)).荧光显微镜下,Ad5/EGFP转染rBMSC 1 d后即可见大量EGFP表达阳性的细胞,第2～3天阳性细胞数多,随后减少,第9天仍可见少量的阳性细胞.AdF35/EGFP转染rBMSC后1～9 d EGFP阳性细胞数始终很少.Ad5/EGFP的转染效率显著性高于AdF35/EGFP的转染效率(t=2.45,P=0.008).经实时PCR检测,rBMSC高度表达CAR,而极低表达CD46,二者之间差异有统计学意义(t=2.57,P＜0.01).结论 Ad5/EGFP对rBMSC的转染效率明显高于AdF35/EGFP,这可能与rBMSC表面高表达CAR而极低表达CD46有关.AdF35不合适作为目的 基因转染rBMSC的载体,Ad5可作为目的 基因有效转染rBMSC的载体,这为后续目的 基因转染rBMSC治疗各种疾病的实验研究奠定了基础.
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