期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
逆转录病毒载体介导针对RANKL的重组蛋白对小鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用
时建；李晓花；孙倍成；林绪涛；张兴元；张帆；欧琨；陈强谱
关键词：基因疗法, 再灌注损伤, 核因子-κB受体活化因子, 核因子-κB受体活化因子配基
摘要：目的 探讨重组蛋白核因子-κB(NF-κB)受体活化因子(RANK) -Fc对小鼠肝缺血再灌注损伤保护作用及可能的机制.方法 据不同处理将小鼠随机分为无血清培养基对照组( Sham组)；目地基因病毒组(RANK-Fc组)；空载体病毒组(eGFP组),各组均经尾静脉将2.5ml溶液(含或不含病毒)6 s内注入.3d后RANK-Fc及eGFP组建立70％肝缺血再灌注损伤模型,热缺血90 min后再灌注不同时间,Sham组行假手术.各组均在1、3、6及24h剖杀小鼠5只,留取血清及肝组织标本.RT-PCR法检测eGFP mRNA表达,Western印迹检测RANK-Fc蛋白表达.HE染色组织学变化及肝脏酶学水平用于肝损伤判断,Western印迹及免疫组织化学方法测定NF-κB的活化程度.c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化水平亦经Western印迹检测.酶联免疫吸附测定法定量检测组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平.细胞凋亡情况由TUNEL法判断.相同时间点各组间比较采用单因素方差分析,两两比较用t检验.结果 应用流体力学体内转染方法,RANK-Fc及eGFP在肝脏成功表达.相同时间点RANK-Fc组[ALT(U/L):1149±109、1574±258、2778±217、461±65;AST( U/L):1027±276、1467±236、2208±378、506±160]肝脏酶学水平均较eGFP组[ALT(U/L):2828±345、5194±944、8403±806、969±147;AST(U/L):2770±343、4778±684、8050±1160、977±115]改善(P＜0.01).与eGFP组相比,RANK-Fc组小鼠肝细胞NF-κB p65(t=6.726)及JNK(t =6.713)表达水平降低,促炎症介质TNF-α[(235±56)比(527±109) pg/ml,t=4.779]、IL-6[(303±73)比(702±126) pg/ml,t =5.482]水平降低,差异均有统计学意义(均P＜0.01),免疫组织化学检查显示细胞核NF-κB阳性染色细胞数减少,HE染色显示肝组织学病变减轻,TUNEL染色阳性细胞显著减少.结论 RANK-Fc对小鼠缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制至少通过部分阻断NF-κB介导的炎症反应及JNK介导的促凋亡而实现.
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