期刊简介

  中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。

           

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  • 杂志名称:中华医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0376-2491
  • 国内刊号:11-2137/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华医学杂志2012年第36期

RNA干扰蛋白激酶B对Eca109细胞功能及血管生成拟态的调节机制

丁宗励;王璐;朱宏;凌亭生;郝波;施瑞华

关键词:食管肿瘤, RNA干扰, 基质金属蛋白酶2, 血管生成拟态
摘要:目的 探讨蛋白激酶B(Akt)对Eca109细胞生物学功能的影响及其与血管生成拟态(VM)相关基因表达的关系.方法 应用倒置荧光显微镜观察Akt的干扰质粒转染食管癌细胞Eca109后绿色荧光蛋白的表达;平板克隆形成实验检测转染前后细胞增殖能力的变化;Transwell方法检测干扰前后细胞迁移能力的变化;三维培养观察并计数转染前后各组细胞的管状结构数量;将Eca109(未转染组)、Eca109/Neo(空载体组)、Eca109/小干扰RNA(siRNA) Akt细胞(稳定转染组)培养后检测细胞凋亡率,了解抑制Akt基因对细胞凋亡的影响;以Western印迹检测各株细胞中Akt蛋白与基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因蛋白表达的关系.结果 Western印迹结果显示稳定转染组Akt蛋白表达低于空载体组及未转染组(0.03 ±0.01比1.49 ±0.39和1.47 ±0.41,均P<0.05).Transwell实验结果,稳定转染组穿过人工膜的细胞数明显少于空载体组与未转染组[(48±9)比(122±11)和(128 ±10)个,均P<0.05];稳定转染组的克隆形成数目显著低于空载体组及未转染组[(63±7)比(148±11)和(163±15)个,均P<0.05].流式细胞仪以膜联蛋白V/AAD双标法显示稳定转染组凋亡率高于空载体组与未转染组(12.2%±1.6%比4.2%±0.8%和4.8%±0.8%,均P<0.05).空载体组及未转染组在基质胶上均能形成典型的血管网状样结构,稳定转染组管状结构数目明显少于未转染组与空载体组[(14.0±1.2)比(30.0±1.2)和(27.7±1.5)个,均P<0.05];稳定转染组MMP-2蛋白表达均低于未转染组及空载体组(均P<0.05).结论 磷脂酰肌醇三磷酸激酶( PI3 K)/Akt通路参与调控了食管鳞癌VM的形成,可能是PI3K/Akt通路通过调节MMP-2来影响食管癌细胞VM的形成.阻断Akt通路有可能成为治疗人食管鳞癌的新靶点.