期刊简介

  中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。

           

往期目录

首页>中华医学杂志
  • 杂志名称:中华医学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0376-2491
  • 国内刊号:11-2137/R
  • 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华医学杂志2013年第04期

Notch1受体在乙型肝炎病毒X基因介导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡中的作用

王轩;周益;袁伟杰;朱楠;尚明花

关键词:肝炎病毒, 乙型, 肾小管, 近端, 上皮细胞, 受体, Notch1, 细胞凋亡
摘要:目的 探讨乙型肝炎病毒X基因(HBx)转染人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞株后对其表达Notch1受体的影响,并观察Notch1受体在HBx介导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡中的作用.方法 用分子克隆的方法构建pcDNA3.1/myc-HBx质粒及pcDNA3.1/myc-Notch1质粒,转染HK-2细胞建立转染株,并应用短发夹RNA(shRNA)干扰技术沉默Notch1基因表达.将细胞分为7组:①正常培养组;②转染HBx空载质粒组;③转染HBx质粒组;④转染HBx质粒+Notch1空载质粒组;⑤转染HBx质粒+Notch1质粒组;⑥转染HBx质粒+Notch1 shRNA空载质粒组;⑦转染HBx质粒+ Notch1 shRNA沉默质粒组.实时定量PCR和Western印迹法验证HBx转染成功,检测细胞中Notch1受体的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测各组细胞的生长抑制率,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况.结果 HK-2细胞经转染HBx基因后可高表达HBx,Notch1 shRNA在HK-2细胞中的转染效率也高达70%,基因沉默有效;转染HBx基因组细胞Notch1水平明显高于正常培养组及转染HBx空载质粒组,且该组细胞凋亡率亦明显高于正常培养组及转染HBx空载质粒组,差异均有统计学意义(14.94% ±0.32%比13.86% ±0.18%、13.67%±0.54%,均P<0.05).转染HBx质粒+Notch1质粒组细胞凋亡率明显低于HBx质粒+Notch1空载质粒组,差异有统计学意义(10.10% ±0.26%比14.79% ±0.02%,P<0.05),其细胞增殖抑制率亦低于HBx质粒+Notch1空载质粒组.而转染HBx质粒+ Notch1 shRNA沉默质粒组细胞凋亡率及细胞增殖抑制率均高于HBx质粒+Notch1 shRNA空载质粒组(均P<0.05).结论 构建pcDNA3.1/myc-HBx质粒并转染肾小管上皮细胞可成功制备乙型肝炎病毒细胞感染模型,由此导致的肾小管上皮细胞生长抑制及凋亡增加可能与Notch1受体异常活化有关.