期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
核心结合因子α-1基因沉默对高磷诱导的血管平滑肌细胞钙化的影响
余毅；魏培丹
关键词：血管中膜, 肾机能不全, 慢性, 动脉硬化, RNA, 小分子干扰, 核心结合因子α1亚基
摘要：目的 研究核心结合因子α-1(Cbfα-1)基因沉默对高磷诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)成骨样分化和钙化的影响.方法 体外原代培养大鼠VSMC.针对大鼠Cbfα-1基因设计合成4对候选小分子干扰RNA(siRNA)序列,以Lipo 2000为载体,转染体外培养的VSMC;FAM荧光标记siRNA优化转染条件.反转录(RT)-PCR检测Cbfα-1 mRNA表达,筛选有效siRNA序列.将有效siRNA序列转染VSMC,细胞分为4组:(1)正常磷组(1.3 mmol/L);(2)高磷组(2.6 mmol/L);(3)siRNA转染组:高磷+Cbfα-1-siRNA;(4)阴性转染对照组:高磷+阴性对照siRNA.RT-PCR和Western印迹法检测Cbfα-1、骨桥蛋白(OPN)基因和蛋白表达;茜素红染色观察细胞钙盐沉积.结果 在Cbfα-1-siRNA浓度为100nmol/L、Lipo为8μl/孔转染条件下,转染效率约55％;筛选佳干扰序列Cbfα-1 siRNA1952,转染24 h沉默效率可达81.8％.与高磷组相比,siRNA转染组Cbfα-1 mRNA表达在转染后24和48 h均明显低于高磷组(24 h:0.335 ±0.059比0.714 ±0.106,48 h:0.574 ±0.036比0.726±0.086,均P＜0.01);Cbfα-1蛋白表达在转染后48和72 h均显著低于高磷组(均P＜0.01),以48 h明显.siRNA有效沉默Cbfα-1基因表达后,siRNA转染组OPN mRNA和蛋白的表达明显低于高磷组(均P＜0.05),且细胞钙盐沉积亦明显低于高磷组.结论 化学合成的Cbfα-1 siRNA可有效抑制VSMC Cbfα-1基因和蛋白的表达,从而抑制高磷诱导的VSMC成骨样转分化和细胞钙化.Cbfα-1可望成为CKD血管钙化治疗的靶点.
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