期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
CGRP修饰MSCs对大鼠颈动脉球囊损伤后血管狭窄的影响
石蓓；陈攀科；龙仙萍；赵然尊；邓文文
关键词：降钙素基因相关肽, 间充质干细胞, 血管平滑肌细胞, 增殖, 血管狭窄
摘要：目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)修饰的间充质干细胞(MSCs)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和血管狭窄的影响.方法 培养应用MSCs与VSMCs,Lv-CGRP-EGFP转染MSCs,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测MSCs中CGRP的表达.MSCs与VSMCs共培养后,实验分为MSCsCGRP+/++ VSMCs组、MSCsCGRP-/-+ VSMCs和MSCsPBS+VSMCs组,应用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)法检测VSMCs增殖能力.构建大鼠颈动脉球囊损伤模型,携带慢病毒的MSCs移植动物模型中,细胞移植后7d,Western印迹法检测血管中CGRP表达,免疫荧光染色检测损伤血管CD31的表达;细胞移植后28 d,苏木精-伊红染色法(H-E染色)检测损伤血管新生内膜/中膜面积;免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 病毒转染后48 h,与PBS组比较,CGRP修饰的MSCs中CGRP的mRNA(0.135±0.049比25.306±0.110)和蛋白水平(1.953±0.039比19.483±0.421)均增高(均P＜0.05).细胞共培养后24、48、72、96 h,MTT染色显示,与MSCsPBS+ VSMCs组比较,MSCsCGRP+/++ VSMCs组中VSMCs的增殖活性明显减弱[24 h(0.54±0.06比0.44±0.06),48 h(0.69 ±0.11比0.54±0.07),72 h(0.87±0.08比0.70 ±0.11),96 h(1.42±0.28比1.10±0.24)均P＜0.05].体内研究显示:细胞移植后7d,与对照组比较,MSCs-CGRP移植组中CGRP表达水平明显增加(23.953±3.039比50.451±5.311)(均P＜0.05),免疫荧光染色检测显示MSCs-CGRP组内膜有CD31连续性表达,而对照组没有.细胞移植后28 d,HE染色显示,与对照组(0.99±0.06)比较,MSCs-CGRP组(0.48±0.03)血管增生内膜面积明显减小(均P＜0.05),免疫组化结果显示,MSCs-CGRP组中血管内膜的PCNA表达量较对照组明显降低(78.4％±10.2％比25.1％±6.0％,P＜0.05).结论 转染CGRP的MSCs能分泌CGRP蛋白和表达CGRP mRNA,CGRP修饰MSCs更能抑制VSMCs增殖,减轻血管损伤后新生内膜面积.
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