期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊,是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师,各级医院的医护及医疗技术与管理人员,是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称:中华医学杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:0376-2491
- 国内刊号:11-2137/R
- 出版周期:周刊
期刊荣誉:1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
血小板源性生长因子诱导下人抗原R对气道平滑肌细胞内转化生长因子β1表达的影响
王娜;闫迪;顾宪民;刘毅;姜淑娟
关键词:肌细胞, 平滑肌, 气管, 人抗原R, 转化生长因子β1, 血小板源生长因子
摘要:目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)诱导下人抗原R(HuR)对气道平滑肌细胞(ASM)内转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 体外培养ASM以PDGF(20 μg/L)分别在0、6、12和24h刺激ASM以诱导哮喘状态.实时荧光定量PCR检测各时间点细胞内HuR、TGF-β1mRNA水平,Western印迹法检测各时间点细胞内HuR、TGF-β1的蛋白水平.利用RNA干扰技术特异性阻断HuR表达,Western印迹法检测干扰组和对照组HuR及TGF-β1在PDGF刺激0、6和12 h的表达水平.酶联免疫吸附法检测干扰组和对照组在PDGF刺激0、6和12h后,细胞培养上清中TGF-β1的蛋白水平.将细胞依次分为对照组、对照+ PDGF 6 h组、干扰组及干扰+PDGF 6 h组,然后各组依次加入放线菌素D(10 mg/L)刺激0、4、8和12 h,检测各组TGF-β1 mRNA的半衰期.结果 PDGF刺激下HuR表达呈现明显的时间依赖性,0、6、12和24h细胞内HuRmRNA及蛋白相对表达量分别为1.00±0.00、1.35±0.14、1.73±0.17、2.07±0.10及0.51±0.10、0.67±0.05、0.83±0.07、0.95±0.02(均P<0.05).TGF-β1的mRNA及蛋白水平也呈时间依赖性,0、6、12和24h细胞内TGF-β1 mRNA及蛋白相对表达量分别为1.00±0.00、1.27±0.06、1.60±0.10、1.87±0.10及0.72±0.09、0.87±0.07、1.13±0.12、1.33±0.05(6与12 h、12与24h两两比较,均P<0.05).PDGF刺激0 h,干扰组与对照组HuR表达差异无统计学意义(P>0.05),PDGF刺激12 h,干扰组HuR表达较对照组降低了21.9% (P <0.05).对照组0、6、12 h TGF-β1蛋白相对表达量分别为0.70±0.05、0.89±0.06、1.06±0.05,而干扰组0、6、12 h TGF-β1蛋白相对表达量分别为0.67±0.09、0.77±0.03、0.89±0.05(与对照组相应时间点比较,均P <0.05).细胞培养上清TGF-β1含量对照组0、6、12 h依次为(773.33±16.32)、(877.97±16.03)、(3 060.34±82.53)ng/L,而干扰组0、6、12 h依次为(277.33±9.93)、(407.77±7.14)、(828.05±11.67)ng/L(与对照组相应时间点比较,均P<0.05).放线菌素D刺激细胞,干扰组TGF-β1的RNA半衰期与干扰+PDGF 6 h组比较差异无统计学意义(P>0.05),与对照组及对照+ PDGF 6 h组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 PDGF可上调ASM内TGF-β1表达,HuR通过增加mRNA稳定性参与PDGF诱导的哮喘状态下TGF-β1的表达过程.
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