期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
靶向干扰DNA-PKcs表达抑制胶质瘤细胞恶性表型及增敏替莫唑胺疗效的分析
张治华；范新义；赵梓彤；宋咏梅；于春江
关键词：神经胶质瘤, RNA干扰, 侵袭, 替莫唑胺
摘要：目的 研究DNA依赖的蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)的表达对胶质瘤细胞生长、侵袭、以及化疗敏感性等生物学行为的影响,并探讨其潜在机制.方法 选取人胶质瘤细胞系H4、U87细胞,分别转染阴性对照(空白对照组)和DNA-PKcs小干扰RNA(siRNA,实验组),利用实时定量PCR(qPCR)与蛋白质免疫印迹技术检测敲降效率;随后,分别采用MTS法检测细胞生长、Transwell小室模型检测细胞侵袭能力,以及利用MTS法检测替莫唑胺半数致死剂量(IC50),探究低表达DNA-PKcs对胶质瘤细胞系上述生物学行为的影响.结果 与空白对照组相比,DNA-PKcs特异性siRNA能显著降低靶基因mRNA与蛋白的表达水平;MTS检测发现,实验组细胞72 h生长能力仅为对照组的52.48%、54.70%(H4细胞)以及52.98%、50.45%(U87细胞);Transwell小室模型检测显示,空白对照组与实验组细胞侵袭能力分别为1.00±0.03、0.41±0.05、0.39±0.04(H4细胞)以及1.00±0.02、0.28±0.04、0.27±0.04(U87细胞);同时,低表达DNA-PKcs还能显著降低替莫唑胺(TMZ)的IC50值(H4细胞:249±27,97±39,88±35;U87细胞:485±41,86±49,73±38);利用免疫印迹技术深入探究降低DNA-PKcs对上述表型影响的潜在机制,结果发现AKT信号通路活性随DNA-PKcs表达水平的降低而下调;相较于空白对照组,实验组中AKT下游效应蛋白,例如c-Myc、MMP9及Survivin表达水平也存在不同程度的下调.结论 降低DNA-PKcs表达水平能显著抑制胶质瘤细胞生长、侵袭能力,增强替莫唑胺的治疗敏感性,其机制主要与抑制AKT信号通路以及下游效应分子表达水平有关.
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