期刊简介
中华医学会主办。本刊是中华医学会会刊,是综合性医学学术周刊，是中国国家图书馆、中国科技信息研究所、医学科学院科技信息研究所、中国科学文献计量评价研究中心等国家科技信息情报部门所列的核心期刊。辟有述评、专家论坛、医药卫生策略探讨、临床研究、基础研究、综述、讲座、医学动态 、疑难病例析评、循征病例报告、病例报告、临床病理讨论、专题笔谈、心理与疾病、国内外学术动态、新技术新方法、新药与临床、临床医学影像、读者来信等栏目。刊物面向国内外全体临床医师，各级医院的医护及医疗技术与管理人员，是广大医务人员了解国内外最新医学研究动态和信息的重要途径。
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- 杂志名称：中华医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0376-2491
- 国内刊号：11-2137/R
- 出版周期：周刊
期刊荣誉：1992年与1996年连续两次在中宣部、国家科委、新闻出版署组织的优秀科技期刊评比中荣获全国优秀期刊一等奖期刊收录：上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 医学文摘, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 剑桥科学文摘, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
Wnt/β-catenin信号调控EMT水平对小鼠胚胎干细胞向肝脏组织结构分化的影响
廖文尉；章诚；刘芙蓉；凌象超；蔡炳；朱晓峰；何晓顺；胡安斌
关键词：胚胎干细胞, 分化, Wnt/β-catenin信号, EMT, 肝脏组织
摘要：目的 在前期体外诱导小鼠胚胎干细胞(ESC)向肝系细胞分化基础上,从细胞上皮间质转化(EMT)角度研究ESC分化为肝脏组织结构的可行性.方法 选用Balb/c小鼠ESC,首先利用肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)等体外诱导ESC向肝系细胞方向分化,然后在分化中期(13 d)、成熟期(17 d)两个时间点动态抑制细胞Wnt/β-catenin信号以降低其EMT水平.后在分化系统中观察分化细胞保持三维组织结构生长情况,检测其中肝系细胞和血管标志物白蛋白(ALB)、血管内皮生长因子(VEGFR)等表达情况,综合判断有无肝脏组织形成,并研究该过程中EMT水平变化的规律和机制.结果 ESC分化过程中,分化前期实验组EMT水平与对照组差别不明显,分化中、后期实验组EMT水平较对照组明显降低,分化第18天和20天,实验组上皮钙黏蛋白(E-cad)基因mRNA相对表达水平分别为0.61 ±0.15和0.47 ±0.05,对照组分别为0.07±0.05和0;实验组的ALB/AFP/CK8/CK19表达水平在同期内较对照组普遍偏高,标志物CD31/VEGFR1在分化中后期较对照组下降缓慢.在ESC培养上清液中,实验组ALB于第11天可检测到,浓度为(0.32±0.02) mg/L,而对照组ALB为(0.19 ±0.05) mg/L;实验组尿素于第13天开始检测到,浓度为(8.7±1.0)μmol/L,对照组尿素浓度为(3.1±1.2) μmol/L.ALB和尿素合成在ESC分化系统培养上清中浓度随分化时间延长而明显升高,并且实验组的ALB、尿素浓度值在相同的时间段内明显多于对照组.另外,实验组分化细胞可保持三维组织状态生长,对照组分化细胞终呈单细胞状态.实验组可检测到肝系细胞标志物以及血管细胞标志物的表达,免疫荧光结果显示类肝细胞和血管结构紧密层状排列,HE染色提示有类肝小叶结构形成,而对照组无血管成分标志物表达.结论 ESC向肝系细胞分化中,在分化中、后期降低EMT水平,可有效促进ESC向肝脏组织结构分化.
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